ÖZET

Amaç:

Kanser kök hücreleri (KKH) terapötik direnç, relaps ve metastazdan sorumlu olan oldukça küçük bir hücre popülasyondan oluşmaktadır. Flavopiridol (Alvocidib), çeşitli KKH’lerine karşı anti-tümör aktiviteye sahiptir. Flavopiridolün CD44+/CD24- meme KKH (MKKH) üzerindeki etki mekanizması henüz tam olarak aydınlatılamamıştır. Bu çalışmada, apoptozis, hücre döngüsü ve biyomoleküler değişiklikler dahil olmak üzere flavopiridolün MKKH üzerindeki etki mekanizmasının çeşitli şekillerde değerlendirilmesi amaçlanmıştır.

Yöntemler:

MCF-7 KKH hattı içerisindeki CD44+/CD24- yüzey belirteç özelliklerine sahip MKKH, akış sitometrisi kullanılarak izole edilmiştir. Apoptozis indüksiyonu Annexin-V yöntemi ile incelenmiştir. Flavopiridolün hücre döngüsü tutulumu üzerine etkisi Muse Cell Analyzer ile belirlenmiş ve G0/G1, S ve G2/M döngüsündeki hücre populasyonları yüzde olarak ifade edilmiştir. İlacın üç boyutlu hücre kültürlerindeki etkisi multiselüler tümör sferoid modeli kullanılarak incelenmiştir. Buna ek olarak, flavopiridolün biyomoleküller üzerindeki etkisi, son zamanlarda çeşitli alanlarda oldukça etkin bir şekilde kullanılan Fourier dönüşüm kızılötesi (FTIR) spektroskopisi kullanılarak değerlendirilmiştir.

Bulgular:

Flavopiridol spesifik olarak erken apoptozu indüklemiştir. Hücre döngü analizleri, flavopiridolün G0/G1 arrestine yol açtığını ortaya koymuştur. Flavopiridol uygulamasından sonra sferoid sayısı ve çapında azalma tespit edilmiştir. ATR-FTIR verileri, flavopiridol uygulamasının hücre içindeki nükleik asitlerde önemli değişimlere yol açtığını göstermiştir.

Sonuç:

Elde edilen bulgular, flavopiridolün nükleik asitlerin yapısını/expresyon seviyesini ve hücre döngüsünü değiştirdiğini ve apoptozu indükleyerek anti-kanser etkiler sergilediğini göstermektedir. Bu veriler, in vivo ve faz çalışmaları tamamlandıktan sonra flavopiridolün meme kanser tedavisi için etkili bir terapötik molekül olabileceğini ortaya koymaktadır.